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Detection by immunofluorescent assay of serotype‐specific and group‐specific antigens of infectious bronchitis virus in tracheas of broilers with respiratory problems

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Pages 465-474
Received 07 Dec 1994
Accepted 15 Feb 1995
Published online: 12 Nov 2007
 

Summary

The performances of seven immunofluorescent assays (IFAs) for infectious bronchitis virus (IBV) were examined on 115 trachea samples collected from 60 broiler flocks with clinical respiratory distress. Whether IBV strains could be serotyped directly on trachea sections by IFAs was examined using four different serotype‐specific monoclonal antibodies (MAbs). Two group‐specific IFAs using two different group‐specific MAbs, were compared with a conventional IFA using a chicken hyperimmune anti‐IBV serum. The use of the six MAbs in the IFA showed, in contrast to the use of the hyperimmune serum, no or only faint non‐specific staining. Although the sensitivities of the two group‐specific IFAs using MAbs were not higher (P> 0.05, power 80%) than the sensitivity of the IFA using hyperimmune serum, the interpretation of the staining of the first two IFAs was easier.

Seventeen of the 41 isolated IBV strains could be typed by IFA using the serotype‐specific MAbs. Serotyping by IFA was possible in about 70% of the tracheas that stained positive with group‐specific MAbs or hyperimmune serum and from which IBV was isolated. Use of serotype‐specific IFAs is a new and very fast way of diagnosing IBV infections including serotyping, providing enough time to adjust the vaccination programme for the next broiler flock.

Resume

La comparaison de sept techniques d'immunofluorescence (IFAs) pour la détection du virus de la bronchite infectieuse (IBV) a été réalisée sur 115 échantillons de trachée prélevés dans 60 troupeaux de reproducteurs présentant des signes cliniques de détresse respiratoire. Dans la mesure où les souches d'IBV pouvaient être sérotypées directement sur des coupes de trachée par IFAs, elles étaient examinées en utilisant quatre anticorps monoclonaux différents spécifiques de sérotype. Deux IFAs spécifiques de groupe utilisant deux anticorps monoclonaux différents ont été comparés par immunofluorescence conventionnelle, utilisant un sérum de poulets hyperimmun anti‐IBV. L'utilisation de six anticorps monoclonaux en immunofluorescence a montré, contrairement à l'utilisation du sérum hyperimmun, aucune coloration non spécifique. Bien que la sensibilité des deux IFAs spécifiques de groupe, utilisant les anticorps monoclonaux, n'était pas plus élevée que la sensibilité de l'immunofluorescence utilisant le sérum hyperimmun, l'interprétation de la coloration des deux premiers IFAs était plus facile.

Dix sept des 41 souches d'IBV isolées ont pu être typées en utilisant des anticorps mono‐clonaux spécifiques de sérotype. Le sérotypage par immunofluorescence a été possible dans environ 70% des trachées par coloration positive avec les anticorps monoclonaux spécifiques de groupe et les sérums hyperimmuns à partir desquels l'IBV était isolée. L'utilisation des IFAs spécifiques de sérotype est un moyen nouveau et très rapide de diagnostiquer les infections à IBV incluant le sérotypage et permettant de définir les programmes de vaccination pour les troupeaux suivants de poulets de chair.

Zusammenfassung

Die Leistungsfähigkeit von sieben Immunfluoreszenztests (IFTs) zum Nachweis von Virus der infektiösen Bronchitis (IBV) wurde an 115 Tracheaproben untersucht, die aus 60 Broilerherden mit Atembeschwerden stammten. Mit Hilfe von vier verschiedenen serotypspezifischen monoklonalen Antikörpern (MAk) wurde untersucht, ob IBV‐Stämme durch IFTs auf Tracheaschnitten direkt serotypisiert werden konnten. Zwei gruppenspezifische IFTs mit zwei verschiedenen gruppenspezifischen MAks wurden mit einem konventionellen IFT unter Verwendung eines Hühner‐Hyperimmunserums gegen IBV verglichen. Die sechs MAk bewirkten im IFT, im Gegensatz zum Hyperimmunserum, keine oder nur eine schwache unspezifische Färbung. Obwohl die Empfindlichkeit der zwei gruppenspezifischen IFTs mit MAk nicht stärker war (P> 0,05, Stärke 80%) als die Empfindlichkeit des IFT mit Hyperimmunserum, war die Interpretation der Färbung in den beiden ersten IFTs einfacher.

Siebzehn der 41 isolierten IBV‐Stämme ließen sich im IFT mit den serotypspezifischen MAk typisieren. Die Serotypisierung mit Hilfe des IFT war bei etwa 70% der Tracheen möglich, die mit gruppenspezifischen MAk oder mit Hyperimmunserum im IFT positiv reagierten und aus denen IBV isoliert wurde. Die Verwendung serotypspezifischer IFTs ist eine neue und sehr schnelle Methode für die Diagnostik von IBV‐Infektionen einschleilich Serotypisierung, was ausreichend Zeit scharrt, das Impfprogramm für die nächste Broilerherde abzustimmen.

Resumen

Se estudiaron siete métodos de inmunofluorescencia (IFA) para detectar virus de la bronquitis infecciosa (IBV) en 115 muestras de tráqueas recogidas de 60 grupos de broilers mostrando síntomas respiratorios. Se utilizaron cuatro anticuerpos monoclonales específicos de serotipos para caracterizar las cepas de IBV por IFA. Se compararon dos IFA específicos de grupo que empleaban anticuerpos monoclonales específicos de grupo con un IFA convencional. que utilizaba suero hiperinmune anti IBV de pollo. El empleo de los anticuerpos monoclonales no mostró o sólo mostró una débil reacción inespecífica, al contrario que lo que ocurrió al utilizar suero hiperinmune. Anque la sensibilidad de los IFA empleando dos monoclonales específicos de grupo no fue superior (P>0.05, potencia 80%) a la sensibilidad del IFA con suero hiperinmune, la interpretación de los resultados si que fue más fácil.

Se pudieron serotipar 17 de los 41 aislamientos de IBV mediante IFA empleando MAb específicos. El serotipaje por IFA fue posible en alrededor el 70% de las tráqueas que presentaron una reacción positiva con suero hiperinmune o con anticuerpos monoclonales específicos de grupo, aislándose IBV de los mismos. El empleo de IFA con especificidad de serotipo es una forma rápida y nueva de diagnosticar infecciones por IBV e incluye el serotipaje de los aislamientos y permite un tiempo suficiente para ajustar el programa de vacunaciones para el siguiente grupo de broilers.

 

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