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Summary
Conjugates of horseradish peroxidase with rabbit IgG antibody against gs antigen (p27) of avian myeloblastosis virus were prepared using glutaralde‐hyde and periodate methods of coupling. Conjugates were evaluated for the detection of gs antigen of avian leukosis and sarcoma viruses in the ELISA system and the periodate conjugate was found to be superior. With an ELISA based on a periodate conjugate it was possible to detect 5 x 103 IU of leukosis virus propagated in cell culture. Comparisons between the PM test and ELISA on biological samples showed the PM test to be 2 to 2,000 times more sensitive than ELISA for vaginal swabs and embryo extracts. ELISA was 16 to 64 times more sensitive than the CF test when comparisons were made on albumens and embryo extracts.
When the ELISA was used for testing vaginal swabs for the prevalence of LLV infection in commercial laying flocks, it appeared that the reliability of ELISA varied. In all five flocks studied, ELISA detected a higher percentage of gs+ [virus+] hens than did the PM test, the proportion of ELISA(+) PM(‐) samples ranging from 3 to 53%. In some flocks ELISA failed to detect a low proportion [ 1 to 5%] of infected hens when vaginal swabs were used for screening. The suitability of ELISA for use in screening of commercial flocks for LLV infection is discussed.
Les conjugués composés d'anticorps IgG de lapin vis‐à‐vis de l'antigène gs (p27) du virus de la myeloblastose aviaire couplés â la péroxydase de raifort ont été préparés en utilisant du glutaraldéhyde et du périodate. Les conjugués ont été comparés pour leur aptitude â détecter l'antigène gs des virus de la leucose et du sarcome aviaires avec la technique ELISA; le conjugué au périodate s'est révélé supérieur. Avec la technique ELISA utilisant le conjugué au péiodate, il a été possible de détecter 5 x 103 IU de virus de la leucose multiplié sur culture cellulaire.
Les comparaisons entre les techniques PM et ELISA à partir d'échantillons biologiques ont montré que la technique PM était 2 à 2000 fois plus sensible que celle de l'ELISA pour des écouvillonnages vaginaux et des extraits d'embryon. La technique ELISA a été 16 â 64 fois plus sensibles que le test de fixation du complément quand les comparaisons ont été effectuées à partir d'albumen ou d'extraits d'embryon.
Quand la technique ELISA a été utilisée pour évaluer l'incidence de l'infection par le virus de la leucose lymphoïde (LLV) dans les troupeaux commerciaux de poules pondeuses à partir d'écouvillonnages vaginaux, il est apparu que la fiabilité de cette technique variait. Dans tous les 5 groupes étudiés, le test ELISA a détecte un pourcentage supérieur de poules gs+ (virus+) que ne 1’ fait le test PM, la proportion d'échantillons ELISA(+) PM(‐) variant de 3 à 53%. Dans quelques troupeaux la technique ELISA n'a pas détecté un faible pourcentage de poules infectées (là 5%) quand les écouvillonnages vaginaux ont été utilisés pour le dépistage. L'intérêt de la technique ELISA utilisée pour le dépistage systématique de l'infection par le LLV dans les troupeaux commerciaux de poules pondeuses est discuté.
Konjugate von Meerrettichperoxidase mit Kaninchen‐IG‐Antikörpern gegen das gs‐Antigen (p27) des aviaren Myeloblastosevirus wurden unter Verwendung von Glutaral‐dehyd‐ und Periodatkupplungsmethoden praepariert. Die Konjugate wurden zum Nachweis des gs‐Antigens der aviäre Leukose‐ und Sarkomviren im ELISA‐System vergleichend eingesetzt, wobei sich das Periodatkonjugat als überlegen erwies. Mit einem auf einem Periodatkonjugat basierende ELISA war es möglich 5 x 103 IU eines in Zellkultur vermehrten Leukosevirus nachzuweisen. Vergleichende Untersuchungen mit dem PM‐Test und dem ELISA von biologischen Proben ergaben, daß der PM‐Test bei der Untersuchung von Vaginalabstrichen und Embryoextrakten 2 bis 2000 mal empfindlicher ist als der ELISA. Dagegen erwies sich der ELISA als 16 bis 64 mal empfindlicher als der CF Test, wenn die Vergleiche bei Albuminen und Embryoextrakten erfolgten.
Wurde der ELISA für die Teststellung der Verbreitung einer LLV Infektion in kommerziellen Legeherden durch Untersuchung von Vaginalabstrichen herangezogen, so schien die Zuverlässigkeit des ELISA schwankend. In allen fünf untersuchten Herden wurde mit dem ELISA eine höherer Prozentsatz von gs+ (virus +) Hennen nachgewiesen als mit dem PM test. Das Verhältnis der ELISA(+):PM(‐) Proben reichte von 3 bis 53%. In einigen Herden konnte ein geringer Prozentsatz (1 bis 5%) der infizierten Hennen mit dem ELISA nicht erfaßt werden, wenn Vaginalproben zum Nachweis Verwendung fanden. Die Eignung des ELISA für die Überprüfung kommerzieller Herden auf das Vorhandensein einer LLV Infektion wird diskutiert.